Ciele pokusu, účastníci a dohľad

V tejto viacmiestnej, dvojito zaslepenej, randomizovanej, placebom kontrolovanej štúdii uskutočnenej v Južnej Afrike sme hodnotili bezpečnosť a účinnosť dvoch štandardných dávok vakcíny ChAdOx1 nCoV-19 podaných 21 až 35 dní v porovnaní s fyziologickým roztokom (0,9). % NaCl) a placebo. Zúčastniť sa mali dospelí vo veku od 18 do 65 rokov, ktorí nemajú chronické alebo dobre kontrolované zdravotné ťažkosti. Medzi účastníkmi bolo 70 HIV negatívnych ľudí zaradených do skupiny 1, pretože sa plánovali rozsiahle štúdie bezpečnosti a imunológie. Hlavnými vylučovacími kritériami boli pozitivita HIV pri skríningu (pre kohortu účinnosti), predchádzajúci alebo súčasný laboratórne potvrdený vírus Covid-19, anamnéza anafylaxie súvisiacej s očkovaním a morbidná obezita (index telesnej hmotnosti). [BMI, the weight in kilograms divided by the square of the height in meters], ≥40). Podrobné kritériá zahrnutia a vylúčenia sú uvedené v doplnkovej prílohe, ktorá je k dispozícii s úplným textom tohto článku na stránke NEJM.org. Vakcína ChAdOx1 nCoV-19 bola vyvinutá na Oxfordskej univerzite, ktorá bola zodpovedná za uskutočnenie a dohľad nad experimentom (pozri doplnkovú prílohu).

Autori mali plný prístup k údajom z pokusu, potvrdili presnosť a úplnosť uvádzaných údajov a zabezpečili presnosť pokusu podľa protokolu (k dispozícii na stránke NEJM.org). Nezávislý výbor pre dohľad nad údajmi a bezpečnosťou prehodnotil údaje o účinnosti a zaslepenosti. Ak sa vyskytnú závažné nežiaduce udalosti, obráťte sa na miestneho lekára s bezpečnosťou. Skúšku monitorovala externá organizácia pre klinický výskum, ktorá zabezpečila dodržiavanie protokolu.

Skúška bola pred začatím skúšky skontrolovaná a schválená Úradom pre reguláciu zdravotných výrobkov v Južnej Afrike a etickými výbormi University of Witwatersrand, Cape Town, Stellenbosch a Oxtrick. Všetci účastníci boli úplne informovaní o postupoch pokusu, možných rizikách a všetkých dokumentoch o informovanom súhlase podpísaných pred registráciou do pokusu.

Skúšobné postupy

Účastníci štúdie boli náhodne rozdelení tak, aby dostali buď 0,33 až 0,5 ml dávku (v závislosti od množstva) vakcíny ChAdOx1 nCoV-19 alebo placebo intramuskulárnou injekciou v deň randomizácie a druhú injekciu o 21 až 35 dní neskôr. Injekcia sa podávala do deltového svalu nedominantného ramena a u účastníkov sa 30 minút po injekcii pozorovali akútne reakcie. Injekciu pripravili a podali pracovníci miesta, ktorí boli oboznámení s úlohami experimentálnych skupín účastníkov, ale nezúčastňovali sa na žiadnych iných pokusných postupoch. Účastníci pokusu a všetok ďalší personál skúšobného procesu nevie o pridelení experimentálnych skupín. Podrobnosti o skúšobných postupoch sú uvedené v protokole (strany 68 – 73). Následné opatrenia pokračujú.

bezpečnosť

Analýza bezpečnosti hodnotila incidenciu požadovaných lokálnych a systémových reakcií počas prvých 7 dní po injekcii, nežiaduce nežiaduce udalosti do 28 dní po injekcii, zmeny bezpečnostných laboratórnych opatrení od základnej hodnoty a závažné nežiaduce udalosti. Viac podrobností o metódach použitých na hodnotenie bezpečnosti a reakcie je uvedených v doplnkovej prílohe. V tejto správe sú zahrnuté údaje o nežiaducich udalostiach do 15. januára 2021.

Test SARS-CoV-2, sekvenovanie celého genómu a zhromaždenie genómu

Použitie testu amplifikácie DNA na infekciu SARS-CoV-2 zahŕňalo odber vzoriek pri plánovaných rutinných návštevách (podrobne popísaných v protokole) a pri neobvyklých návštevách, keď mali účastníci akékoľvek príznaky naznačujúce ochorenie Covid-19. Účastníkom boli v čase randomizácie odporúčané klinické príznaky, ktoré by mali viesť k návšteve s cieľom vyšetriť možnú infekciu SARS-CoV-2 (tabuľka S1 v doplnkovej prílohe). Účastníkom boli navyše každé dva týždne zasielané krátke správy ako pripomienka, že ak majú príznaky, majú sa predložiť na vyšetrovanie. Podrobnosti o teste amplifikácie nukleových kyselín, sekvenovaní celého genómu a fylogenetickej analýze sú opísané v doplnkovej prílohe.

Neutralizačné testy

Sérologický stav SARS-CoV-2 sa hodnotil randomizáciou pomocou testu IgG na jadrový proteín (N), ako je opísané inde.⁸ Pre štúdie neutralizácie protilátok sa uskutočnili testy neutralizácie pseudovírusov (pozri časť Metódy v doplnkovej prílohe) pre prototyp vírusu na vzorkách séra získaných 2 týždne po druhej dávke vakcíny u 107 vybraných príjemcov vakcíny ChAdOx1 nCoV-19. Ktorí boli negatívni na IgG N proteín po registrácii.

Na vyhodnotenie neutralizačnej aktivity protilátky získanej z vakcíny proti B.1.351, vzorky séra od účastníkov skupiny 1, ktorí mali po zaradení negatívny stav séra pre SARS-CoV-2, a zmenili neutralizačný test pseudovírusu na pôvodný vírus elevácie D614G 14 dni po druhej injekcii sa testovala aktivita s variantom B.1.351 pomocou pseudovírusu a testov na živý vírus.^{14, 21} Pred neutralizáciou experimentálnych skupinových mapovaní sa uskutočnil test aktivity neutralizačnej protilátky proti pôvodnému a variantnému vírusu B.1.351. Boli uskutočnené testy pseudovírusu na neutralizačnú aktivitu proti pôvodnému hrotu D614G, trojitej mutácii RBD (obsahujúcej iba K417N, E484K a N501Y) a hrot B.1.351 bol vykonaný v Národnom ústave infekčných chorôb (Južná Afrika).¹⁴ Test neutralizácie živého vírusu sa uskutočňoval pomocou testu fokálnej tvorby na mikro-neutralizáciu v bunkách Vero E6 v Africkom inštitúte pre výskum zdravia v Južnej Afrike.^{14, 21} Podrobnosti o testoch na neutralizáciu pseudovírusov a živých vírusov boli zverejnené a stručne opísané v doplnkovej prílohe.^{14, 21}

Ciele podujatia

Primárnym koncovým ukazovateľom bola účinnosť proti testu amplifikácie nukleovej kyseliny – potvrdenie nástupu symptómov Covid-19 viac ako 14 dní po druhej injekcii u účastníkov, ktorí boli pri randomizácii negatívni. Potvrdené príznaky Covid-19 a skóre mierneho, stredného a závažného ochorenia boli predtým identifikované a zmapované v tabuľkách S1 a S2. Prípady Covid-19 hodnotili najmenej dvaja lekári, ktorí boli nezávislí od štúdie a nevedeli o zaradení do experimentálnej skupiny. Kontrolóri diskutovali o konfliktných hodnoteniach. Účinnosť vakcíny proti variantu B.1.351 bola vopred definovaným sekundárnym cieľom.

Medzi ďalšie sekundárne ciele účinnosti patrila účinnosť proti Covid-19 v bežnej populácii (vrátane účastníkov, ktorí boli pri randomizácii séropozitívni), účinnosť špecifická pre séropozitívnu primárnu skupinu a účinnosť proti Covid-19 s výskytom viac ako 14 alebo viac ako 21 dní po dávke. Najprv. Viac podrobností o sekundárnych analýzach účinnosti je uvedených v doplnkovej prílohe. Ďalej bola vykonaná post-ad hoc analýza bežnej populácie a sérokonverzie s cieľom posúdiť účinnosť vakcíny proti chorobe vyskytujúcej sa viac ako 14 dní po prvej injekcii, s prípadmi sledovaných parametrov obmedzené na 31. októbra 2020, ako alternatíva k non-B. 1 351 variantov Covid-19. Identifikácia premennej B.1.351 sa začala až v regiónoch, kde boli založené experimentálne miesta (Johannesburg a Tshwane v Gautengu a metro Cape v provincii Západné Kapsko) od polovice novembra 2020 (obr. S1).¹⁵

Štatistická analýza

Do analýzy bezpečnostných reakcií boli zahrnutí účastníci, ktorí dostali najmenej jednu dávku ChAdOx1 nCoV-19 alebo placeba a ktorí vrátili vyplnené denníkové karty až siedmy deň po prvej injekcii. Výskyt všetkých prejavov a príznakov miestnej a systémovej reakcie požadovanej 7 dní po očkovaní, nežiaduce udalosti a závažné nežiaduce udalosti sú podľa testovanej skupiny prezentované do 15. januára 2021.

Analýza primárnej účinnosti bola založená na koncovom ukazovateli miernej, strednej alebo závažnej zlúčeniny Covid-19 a vyžadovala 42 prípadov na zistenie účinnosti vakcíny najmenej 60% (s minimom 0% pre 95% interval spoľahlivosti), s 80% pevnosť. Účinnosť vakcíny bola vypočítaná ako 1 mínus relatívne riziko a 95% intervaly spoľahlivosti boli vypočítané pomocou presnej metódy Clopper-Pearson. Do skupiny populácie boli pre každý protokol zahrnutí iba účastníci (všetci účastníci, ktorí dostali dve dávky vakcíny alebo placeba a boli zoskupení podľa injekcie, ktorú dostali, bez ohľadu na to, aké označenie skupiny plánovali), ktorí boli negatívni na SARS-CoV-2 pri zápise. Analýza počiatočnej efektívnosti. Vykonala sa analýza citlivosti, ktorá zahŕňala dvoch negatívnych účastníkov v skupine upraveného liečebného zámeru (všetci účastníci, ktorí dostali dve dávky a boli zoskupení podľa plánovanej úlohy, bez ohľadu na to, akú injekciu dostali). Intervaly spoľahlivosti uvedené v tomto článku neboli upravené pre viacnásobné porovnania.